원리
유전자 복제(gene cloning)의 기본 원리는 우선 원하는 유전자를 지닌 세포로부터 DNA를 추출하고 적절한 제한효소로 절단한 다음 같은 제한효소로 절단한 운반체에 붙인다. 이를 세포내로 도입하여 형질전환체를 얻어 유전체 도서관을 만들고, 이들 중에서 원하는 유전자를 지닌 클론을 선별한다. 이
복제와 상관없이 독자적으로 복제되는 특징이 있다. 박테리아의 항생제에 대한 내성이 한 세포에서 다른 세포로 옮겨질 때 plasmid를 통해 이루어진다고 알려진 후 항생제 내성에 대한 유전자 뿐 아니라 항생제 합성이나 독물질 합성, 질소고정 및 분해, 여러 효소들에 대한 유전자를 함께 가지고 있음이
효소를 첨가해주어야 하는 불편함이 있었다. 그래서 개발된 것이 75℃ 온천에서 분리한 세균 고도호열균(Thermus aquaticus)에서 얻은 DNA polymerase이다. Taq 1 polymerase는 75℃에서 최적으로 DNA를 합성하고 94℃에서도 안전성을 갖기 때문에 각 cycle 마다 효소를 첨가할 필요 없이 특정염기서열을 증폭할 수 있다.
세균이 자신의 세포 내로 침입해
들어오는 바이러스와 같은 외부 DNA를 제거하기 위한 방어기전으로 가지고 있는
것이며, 자신의 DNA는 절단부위의 염기( adenine, cytosine)를 Methylation 시켜서 자신의 제한효소가 자신의 DNA를 자를 수 없게 보호하고 있다. 제한효소는 여러
종류가 있는데, 보통 DNA
Chapter 01. 병원미생물학 소개
Ⅰ. 병원미생물학의 이해
√ 미생물학(microbiology; micro=small,biod=living) : 육안으로 볼 수X 아주 작은 생물체 연구
1) 바이러스(virus)
? 감염병을 일으키는 병원체 중 가장 작으며, 숙주세포에 의존해야 증식
? 한 종류의 핵산만
2) 세균(bacteria) w 대표적인 원핵생물
? DNA와 RNA h
Alkaline lysis method
- 세포의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA만을 분리하는 방법
- Chromosomal DNA 와 plasmid의 고유한 형태 구조 차이를 이용 !
; Chromosomal DNA - 상대적으로 size가 크고, double heilx
Plasmid - size가 작고, supercoiled 형태 -> pH에 변화에 의한 변성↓
Alkaline Lysis Method
DNA gel electrophoresis(전기영동)
- DN
1.실험 목적
- 분리한 plasmid DNA를 제한효소로 처리하고, 전기 영동법과 PCR을 이용하여
DNA를 분리하고 확인하는 기술을 습득한다. 제한효소의 종류에 따른 절단 방식을
알아본다.
2. 실험 원리
1) 제한 효소 (Restriction enzyme)
(1) 제한 효소의 정의
* 제
◆실험 첫째날 2011년 10월 24일 월요일
▶원리
1 Restriction enzyme 처리
- 이 실험에서 우리는 아무 처리되지 않은 plasmid와 foreign gene을 plasmid에 삽입하여 만든 inserted plasmid에 각각 제한효소를 처리하는 실험을 했다.
- 제한효소란 DNA의 특정한 염기서열을 인식하고 인식부위 또는 그 근처의 특정 이중사
1.1. 미생물이란?
미생물이란 무엇인가? 미생물은 일반적으로 육안의 가시한계를 넘어선 0.1mm이하의 크기인 미세한 생물을 일컫는다. 하지만 이것으로 정의를 내리기엔 한계가 있다. 초기에 미생물을 정의할 때 보이지 않는 생물들의 분류를 그 범주 안에 포함시켰다. 이후에 그 분류에 속한 생물들 중
플라스미드를 도입해주면 병원성이 회복되지만 mgtA나 mgtB는 그러한 효과를 보여주지 못한다. 이들 mgt 유전자들은 SPI-3 지역에 위치하고 있다.
연구팀은 SPI-C라는 대식세포에서의 생존을 가능하게 하는 다른 병원성 유전자지역을 발견하였다. SPI-C 단백질은 세포에 침입할 때 숙주세포로 분비되어 세포